只需自備標(biāo)準(zhǔn)品、抗體對(duì)和HRP/AP檢測試劑，輕松制備ELISA。

Innova Biosciences FlexLISA^?主要是用于開發(fā)和優(yōu)化雙抗體夾心ELISA，將抗體對(duì)分別與Streptavidin和HRP/AP標(biāo)記，然后將樣本和標(biāo)記抗體對(duì)分別加入預(yù)包被Biotin 96孔板，室溫孵育1小時(shí)，清洗后加入酶檢測試劑即可實(shí)現(xiàn)檢測。

                                                試劑盒組分

自備：標(biāo)準(zhǔn)品、抗體對(duì)和HRP/AP檢測試劑

實(shí)例數(shù)據(jù)：

1. 使用LL-HRP標(biāo)記CRP檢測抗體并使用CRP標(biāo)準(zhǔn)品做校準(zhǔn)曲線的ELISA檢測；

檢測試劑：TMB；

標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合：線性方程（A）和4參數(shù)對(duì)數(shù)方程（B）；

測定800,200和50 pg/ml CRP（C）的批內(nèi)％CV（n = 24）。

2. 使用LL-HRP和Ampliflu^?Red（激發(fā)波長：530nm，發(fā)射波長：590nm）

作為檢測試劑對(duì)CRP的ELISA檢測；

3. 使用LL-AP標(biāo)記CRP檢測抗體并使用CRP標(biāo)準(zhǔn)品做校準(zhǔn)曲線的ELISA檢測；

檢測試劑：PNPP；

標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合：線性方程（A）和4參數(shù)對(duì)數(shù)方程（B）；

測定800,200和50 pg/ml CRP（C）的批內(nèi)％CV（n = 24）。

4. 步驟：在鏈酶親和素標(biāo)記CRP捕獲抗體和HRP/AP標(biāo)記CRP檢測抗體存在下，耗盡CRP的人血清加到250pg/ml CRP并連續(xù)稀釋后加到透明的96條板狀板中；

制備已知量的CRP的標(biāo)準(zhǔn)曲線也加到板中。

TMB和PNPP分別檢測HRP和AP。

計(jì)算：擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過測量吸光度來確定添加到板中的樣品的CRP濃度。

結(jié)果：對(duì)于所有稀釋度，計(jì)算的CRP量在實(shí)際值的10％以內(nèi)。